核酸检测的一般流程
第一步:咽拭子采样
本次的新冠肺炎核酸检测,第一步就是对患者进行咽拭子采样。这主要是疾控中心的人员或者发热门诊的工作人员进行采样,只需要患者要将口罩摘下来,然后张嘴发出“啊”的声音,使整个沿后壁暴露出来。之后采样人员再将采样棒伸到病人的咽后壁,涂擦取样,最后将样本放入试剂管里密封,这样就完成采样。
在采样的时候患者会有一种呕吐感,毕竟采样都时候是在咽后壁,会产生一定的刺激。而且取完之后还会有一段时间有点异物感,毕竟采样泵在咽后壁周围来回涂擦,不过呢这些都是正常的。
采样其实是非常重要的,这关乎到检测结果的准确性,如果采样不合格的话,没有涂抹到病毒的话,那么就会影响到结果的检测。另外,采样时也是比较危险的,毕竟在采样时面对患者,如果是确诊患者那么就是直接面对病毒了。所以采样人员斗是全部武装,从头到脚都要包得严严实实,就是做好防护。
当采样完成之后,就有专门的人员通过样本交接专用通道,将刚刚采集到的咽拭子标本与检验室的检验人员进行样本交接。
第二步:病毒灭活
(放入56℃的水浴箱30分钟灭活)
当采集好的咽拭子标本送到检验科之后,检验科的工作人员就会对样本进行灭活处理。
为什么要进行病毒灭活处理呢?因为这是核酸提取的第一步。我们将样本放入水浴箱内,进行一个56度30分钟的杀毒操作。
为什么要经过56度30分钟的杀毒操作呢?这是因为病毒在经过56度30分钟的水浴处理后,就可以将病毒灭活,可以在不影响检测结果的情况下,确保检测人员安全,这样操作人员感染风险就会大大降低。
另外,当样本经过30分钟灭活之后,还需要常温静置20分钟,这样可以防止高温开盖从而导致的气溶胶污染。
第三步:核酸提取
经过病毒灭活之后就到核酸提取的步骤,这个操作是非常危险的,必须在生物安全柜中进行操作,因为这是离病毒最近,也是感染风险最大的地方。在安全柜内打开样本盖子提取核酸时,需要非常小心的打开盖子,因为一不小心就可能形成气溶胶,不仅会污染安全柜,而且也可能让其他样本交叉感染,形成“假阳性”。
所谓的核酸提取就是将样本中的病毒 RNA,也就是核酸,提取出来。但是因为 RNA 结构不稳定,需要先把它转化成 DNA。这个过程就汲及到PCR反应,就是通过变性、退火、延伸等步骤,通过逆转录的过程,将RNA两条链分开,使病毒信息传递到DNA 单链上,这样就可以将病毒的核酸提取出来了。
第四步:基因扩增
核酸提取出来后,数量是很少的,机器根本就探测不到。这个时候就需要以提取出来的病毒核酸作为模板,让 DNA 不断自我复制,而经过20~30次的复制后,模板DNA的含量就可以扩大到100万倍以上。这样经过扩增之后,如果存在有新型冠状病毒核酸的话,那么就可以检测出来。就像我们微生物室检查是否有细菌感染的时候,就需要将细菌进行培养,之后才能进行鉴定和药敏试验。这都是同一个道理,就是数目要足够多才能检测出来。
总的来说,整个核酸检测的核心就是让 DNA 不断自我复制,并且积累荧光信号,这样到最后才能被仪器检测出来,从而进行判读。
在理想情况下,病人样本中如果有新冠病毒,循环数和荧光量之间就会形成 S 形曲线,即可判断核酸检测阳性。如果没有或有少量新冠病毒,那么就没有类似曲线,即可判断核酸检测为阴性。
总之,实验室的核酸检测这一整个过程,从样本灭活、核酸提取、基因扩增、结果分析,到最终出报告,大概要持续6个小时。如果检测结果为“阳性”,还需要再做一次进行复核。所以说,一份新冠核酸阳性报告出炉,至少需要12小时。
核酸检测的一般流程
第一步:咽拭子采样
本次的新冠肺炎核酸检测,第一步就是对患者进行咽拭子采样。这主要是疾控中心的人员或者发热门诊的工作人员进行采样,只需要患者要将口罩摘下来,然后张嘴发出“啊”的声音,使整个沿后壁暴露出来。之后采样人员再将采样棒伸到病人的咽后壁,涂擦取样,最后将样本放入试剂管里密封,这样就完成采样。
在采样的时候患者会有一种呕吐感,毕竟采样都时候是在咽后壁,会产生一定的刺激。而且取完之后还会有一段时间有点异物感,毕竟采样泵在咽后壁周围来回涂擦,不过呢这些都是正常的。
采样其实是非常重要的,这关乎到检测结果的准确性,如果采样不合格的话,没有涂抹到病毒的话,那么就会影响到结果的检测。另外,采样时也是比较危险的,毕竟在采样时面对患者,如果是确诊患者那么就是直接面对病毒了。所以采样人员斗是全部武装,从头到脚都要包得严严实实,就是做好防护。
当采样完成之后,就有专门的人员通过样本交接专用通道,将刚刚采集到的咽拭子标本与检验室的检验人员进行样本交接。
第二步:病毒灭活
(放入56℃的水浴箱30分钟灭活)
当采集好的咽拭子标本送到检验科之后,检验科的工作人员就会对样本进行灭活处理。
为什么要进行病毒灭活处理呢?因为这是核酸提取的第一步。我们将样本放入水浴箱内,进行一个56度30分钟的杀毒操作。
为什么要经过56度30分钟的杀毒操作呢?这是因为病毒在经过56度30分钟的水浴处理后,就可以将病毒灭活,可以在不影响检测结果的情况下,确保检测人员安全,这样操作人员感染风险就会大大降低。
另外,当样本经过30分钟灭活之后,还需要常温静置20分钟,这样可以防止高温开盖从而导致的气溶胶污染。
第三步:核酸提取
经过病毒灭活之后就到核酸提取的步骤,这个操作是非常危险的,必须在生物安全柜中进行操作,因为这是离病毒最近,也是感染风险最大的地方。在安全柜内打开样本盖子提取核酸时,需要非常小心的打开盖子,因为一不小心就可能形成气溶胶,不仅会污染安全柜,而且也可能让其他样本交叉感染,形成“假阳性”。
所谓的核酸提取就是将样本中的病毒 RNA,也就是核酸,提取出来。但是因为 RNA 结构不稳定,需要先把它转化成 DNA。这个过程就汲及到PCR反应,就是通过变性、退火、延伸等步骤,通过逆转录的过程,将RNA两条链分开,使病毒信息传递到DNA 单链上,这样就可以将病毒的核酸提取出来了。
第四步:基因扩增
核酸提取出来后,数量是很少的,机器根本就探测不到。这个时候就需要以提取出来的病毒核酸作为模板,让 DNA 不断自我复制,而经过20~30次的复制后,模板DNA的含量就可以扩大到100万倍以上。这样经过扩增之后,如果存在有新型冠状病毒核酸的话,那么就可以检测出来。就像我们微生物室检查是否有细菌感染的时候,就需要将细菌进行培养,之后才能进行鉴定和药敏试验。这都是同一个道理,就是数目要足够多才能检测出来。
总的来说,整个核酸检测的核心就是让 DNA 不断自我复制,并且积累荧光信号,这样到最后才能被仪器检测出来,从而进行判读。
在理想情况下,病人样本中如果有新冠病毒,循环数和荧光量之间就会形成 S 形曲线,即可判断核酸检测阳性。如果没有或有少量新冠病毒,那么就没有类似曲线,即可判断核酸检测为阴性。
总之,实验室的核酸检测这一整个过程,从样本灭活、核酸提取、基因扩增、结果分析,到最终出报告,大概要持续6个小时。如果检测结果为“阳性”,还需要再做一次进行复核。所以说,一份新冠核酸阳性报告出炉,至少需要12小时。
核酸检测的一般流程
1、接样本
工作人员对患者病毒样本放置在专用运输箱内,医护人员走到门口接过样本。
2、打开样本前的步骤
打开样本前,必须做好全方位的防护。在实验室的洁净室,汪博士穿上 隔离衣、防护服、防护口罩、护目镜、面屏、双层医用乳胶手套、防水靴套,每个步骤都不能有错。
3、核对样本信息
进入实验室核心区后,先用75%酒精对送样箱进行外表面消毒,消毒完毕后核对被检样本姓名、性别、年龄、编号等信息。
4、样本灭活
接下来就是进行最“凶险”的操作——样本灭活,使样本不具有传染性,同时提取病毒核酸。
5、PCR反应体系配制
走出核心实验区,开始进行PCR反应体系配制,将提取的病毒核酸加入到核酸扩增检测试剂中。
6、放置在ABI7500荧光定量PCR仪上
然后,将配制好的PCR反应物放置在ABI7500荧光定量PCR仪上。
7、开始核酸扩增检测
在电脑上设置PCR反应条件,运行仪器,开始核酸扩增检测。
8、检测完成
实时关注检测情况,大约1.5小时后,核酸扩增完成,进行检测结果判读。至此,该样本的新型冠状病毒核酸检测就算完成了,整个流程大概4小时。
核酸检测的一般流程
1、接样本
工作人员对患者病毒样本放置在专用运输箱内,医护人员走到门口接过样本。
2、打开样本前的步骤
打开样本前,必须做好全方位的防护。在实验室的洁净室,汪博士穿上 隔离衣、防护服、防护口罩、护目镜、面屏、双层医用乳胶手套、防水靴套,每个步骤都不能有错。
3、核对样本信息
进入实验室核心区后,先用75%酒精对送样箱进行外表面消毒,消毒完毕后核对被检样本姓名、性别、年龄、编号等信息。
4、样本灭活
接下来就是进行最“凶险”的操作——样本灭活,使样本不具有传染性,同时提取病毒核酸。
5、PCR反应体系配制
走出核心实验区,开始进行PCR反应体系配制,将提取的病毒核酸加入到核酸扩增检测试剂中。
6、放置在ABI7500荧光定量PCR仪上
然后,将配制好的PCR反应物放置在ABI7500荧光定量PCR仪上。
7、开始核酸扩增检测
在电脑上设置PCR反应条件,运行仪器,开始核酸扩增检测。
8、检测完成
实时关注检测情况,大约1.5小时后,核酸扩增完成,进行检测结果判读。至此,该样本的新型冠状病毒核酸检测就算完成了,整个流程大概4小时。
核酸检测的一般流程
第一步用咽拭子擦拭咽后壁及双侧咽扁桃体处各5-10次,且不断旋转拭子,采取样本;
第二步需要医务人员进行留样,将拭子头浸入细胞保存液中,折断尾部后立即旋紧管盖;
第三步保存,将样本管放入密封袋中及时送检,而送检过程中需要严格的运输环境,2-8摄氏度保存。
第四步操作核酸提取(反应管理),将灭活病毒后的样本进行核酸提取,用于后续检测。可采用手工法,将生理盐水逐一加入到样本中,这种方式需要增加近半分钟的检测时间。也可以采用自动化的设备,如核酸提取仪等。
第五步荧光PCR核酸检测,也就是上机器检测,将提取物进行荧光PCR扩曾反应,需要70—80分钟。结束,整个检测过程就是这样。
核酸检测的一般流程
第一步用咽拭子擦拭咽后壁及双侧咽扁桃体处各5-10次,且不断旋转拭子,采取样本;
第二步需要医务人员进行留样,将拭子头浸入细胞保存液中,折断尾部后立即旋紧管盖;
第三步保存,将样本管放入密封袋中及时送检,而送检过程中需要严格的运输环境,2-8摄氏度保存。
第四步操作核酸提取(反应管理),将灭活病毒后的样本进行核酸提取,用于后续检测。可采用手工法,将生理盐水逐一加入到样本中,这种方式需要增加近半分钟的检测时间。也可以采用自动化的设备,如核酸提取仪等。
第五步荧光PCR核酸检测,也就是上机器检测,将提取物进行荧光PCR扩曾反应,需要70—80分钟。结束,整个检测过程就是这样。
核酸检测一般流程
1、注册或在本区办公的各类企业,可致电相关医院,提出检测需求;
2、签署相关协议后,企业预约安排员工的核酸样本采集时间,由医院进行安排,让检测对象有序采样;
3、企业员工前往指定采样点,由专业医护人员进行采样,样本随后将送至相关机构进行检测;
4、企业员工做好个人防护后,离开采集点,等待一两天后获得核酸检测结果;
5、如结果为阴性,则排除;结果为阳性,疾控中心将第一时间启动联动机制,协调相关人员前往医院发热门诊进行筛查和流调,同时排查密切接触者。
核酸检测一般流程
1、注册或在本区办公的各类企业,可致电相关医院,提出检测需求;
2、签署相关协议后,企业预约安排员工的核酸样本采集时间,由医院进行安排,让检测对象有序采样;
3、企业员工前往指定采样点,由专业医护人员进行采样,样本随后将送至相关机构进行检测;
4、企业员工做好个人防护后,离开采集点,等待一两天后获得核酸检测结果;
5、如结果为阴性,则排除;结果为阳性,疾控中心将第一时间启动联动机制,协调相关人员前往医院发热门诊进行筛查和流调,同时排查密切接触者。